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多平臺、多方法RNA文庫構(gòu)建

 

RNA是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補配對原則,轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈,主要功能是實現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達,是遺傳信息傳遞過程中的橋梁,主要存在于生物細胞以及部分病毒、類病毒中。

眾所周知,total RNA中95%以上都是核糖體RNA(rRNA),可rRNA卻非常保守,在不同的組織、器官當(dāng)中的表達極度穩(wěn)定; 而只占total RNA總量2%-3%的mRNA在RNA當(dāng)中信息含量卻最為豐富,因此mRNA成為人們在科學(xué)研究中的重要關(guān)注點。


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組織或細胞總RNA中各種RNA分布餅狀圖



而某個物種的特定組織或細胞在某一生理功能狀態(tài)下發(fā)生的mRNA產(chǎn)物的轉(zhuǎn)錄,即轉(zhuǎn)錄組,是基因組遺傳信息傳遞和表達的重要步驟和過程。

通過高通量mRNA測序可以獲得大量轉(zhuǎn)錄本序列信息,定量基因轉(zhuǎn)錄表達水平,獲得基因組轉(zhuǎn)錄區(qū)域及其位點信息等,在基因組序列拼接注釋、樣品間基因轉(zhuǎn)錄差異表達及其功能研究等方面有重要作用。可從整體水平研究基因功能以及基因結(jié)構(gòu),揭示特定生物學(xué)過程以及疾病發(fā)生過程中的分子機理,已被廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究、臨床診斷和藥物研發(fā)等領(lǐng)域。

RNA樣本的建庫質(zhì)量對于后續(xù)上機測序至關(guān)重要,可直接影響后續(xù)結(jié)果的分析。因此,一個好的建庫試劑盒對于RNA測序至關(guān)重要。全式金目前已推出3款RNA建庫試劑盒,分別適用于Illumina和MGI平臺,均具有高數(shù)據(jù)質(zhì)量、高文庫轉(zhuǎn)化率的特點。


常規(guī)RNA建庫


? TransNGS? RNA-Seq Library Prep Kit for Illumina?

本產(chǎn)品是針對Illumina高通量測序平臺開發(fā)的可用于構(gòu)建鏈特異性或非鏈特異性轉(zhuǎn)錄組文庫的試劑盒,在5 h之內(nèi)可將1-100 ng處理后的RNA構(gòu)建成高質(zhì)量的測序文庫,得到的文庫產(chǎn)量高、信息完整。

 文庫構(gòu)建原理示意圖


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 與競品的比較

1 μg、100 ng 人血總RNA樣品去除rRNA后(TransGen, KD101),分別使用TransGen、Company N和Company V建庫產(chǎn)品進行建庫測序及分析,結(jié)果表明,TransGen產(chǎn)品在測序數(shù)據(jù)質(zhì)量、基因表達水平以及相關(guān)性方面與競品相比,性能一致。

? 測序數(shù)據(jù)質(zhì)量


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? 比對區(qū)域分布


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? 基因表達及差異分析


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? 相關(guān)性分析


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快速RNA建庫  

              

?  TransNGS? Fast RNA-Seq Library Prep Kit for Illumina? 

本產(chǎn)品是針對Illumina高通量測序平臺開發(fā)的專用于構(gòu)建鏈特異性或非鏈特異性轉(zhuǎn)錄組文庫的試劑盒,可一步完成二鏈合成、末端修復(fù)與加A反應(yīng),中間不需要純化步驟,極大地簡化了操作流程,縮短了建庫時間,可在4 h之內(nèi)將0.1 ng-100 ng處理后的RNA構(gòu)建成高質(zhì)量的測序文庫,得到的文庫產(chǎn)量高、信息完整。

 文庫構(gòu)建原理示意圖


1.png


 與競品的比較

使用 mRNA 純化試劑盒對人、小鼠、小麥和煙草的總RNA進行mRNA捕獲,其中人和小鼠投入200 ng總RNA,小麥和煙草投入1000 ng總RNA;分別使用TransGen和Company V建庫試劑盒進行RNA文庫構(gòu)建,文庫分選后檢測文庫產(chǎn)量、峰型,并進行測序分析。

? 文庫產(chǎn)量



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? 建庫峰型


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?測序數(shù)據(jù)質(zhì)量


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?相關(guān)性分析


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?   TransNGS? Fast RNA-Seq Library Prep Kit for MGI?

本產(chǎn)品是針對MGI高通量測序平臺開發(fā)的專用于構(gòu)建鏈特異性或非鏈特異性轉(zhuǎn)錄組文庫的試劑盒,可一步完成二鏈合成、末端修復(fù)與加A反應(yīng),中間不需要純化步驟,極大地簡化了操作流程,縮短了建庫時間,可在4 h之內(nèi)將0.1 ng-100 ng處理后的RNA構(gòu)建成高質(zhì)量的測序文庫,得到的文庫產(chǎn)量高、信息完整。

 文庫構(gòu)建原理示意圖


1.png


 與競品的比較

使用mRNA純化試劑盒對人、小鼠和擬南芥的總RNA進行mRNA捕獲,其中人和小鼠投入200 ng總RNA,擬南芥投入1000 ng總RNA;分別使用TransGen和Company V建庫試劑盒進行RNA文庫構(gòu)建,文庫分選后檢測文庫產(chǎn)量、峰型,并進行測序分析。結(jié)果表明,TransGen產(chǎn)品與Company V產(chǎn)品性能一致。

?文庫產(chǎn)量


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?建庫峰型


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?測序數(shù)據(jù)質(zhì)量


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?相關(guān)性分析


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相關(guān)產(chǎn)品推薦


?   TransNGS? rRNA Depletion Kit (Human/Mouse/Rat)

產(chǎn)品特點   

? 可有效去除人/小鼠/大鼠高達99%的ribosomal RNA。

? 提供Control qPCR Primer Sets,檢測去除前后ribosomal RNA和非ribosomal RNA含量的變化。

測序數(shù)據(jù)質(zhì)量

1 μg人(Human, H)、小鼠(Mouse, M)和大鼠(Rat, R)總RNA樣品,分別使用TransGen和Company K產(chǎn)品去除rRNA后,進行建庫(TransGen, KP601)測序及分析,結(jié)果表明,TransGen產(chǎn)品在測序數(shù)據(jù)質(zhì)量上與競品相比,性能一致,甚至優(yōu)于競品。


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? TransNGS? rRNA Depletion Kit (Bacteria)

產(chǎn)品特點   

? 可有效去除各種細菌高達99%的ribosomal RNA。

? 操作簡便。

測序數(shù)據(jù)質(zhì)量

2 μg大腸桿菌(Escherichia coli, E. coli)總RNA樣品,分別使用TransGen、Company V和Company I產(chǎn)品去除rRNA后,進行建庫(TransGen, KP601)測序及分析。結(jié)果表明,TransGen產(chǎn)品在測序數(shù)據(jù)質(zhì)量上與競品相比,性能一致。


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 成功測試菌種 (rRNA Rate < 5%)


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? TransNGS? rRNA Depletion Kit (Animal)

產(chǎn)品特點   

? 可有效去除各種動物高達99%的ribosomal RNA。

? 操作簡便。

測序數(shù)據(jù)質(zhì)量

2 μg斑馬魚(Zebra fish, Zebra) 總RNA樣品,分別使用TransGen和Company I產(chǎn)品去除rRNA后,進行建庫(TransGen, KP601)測序及分析,結(jié)果表明,TransGen產(chǎn)品在測序數(shù)據(jù)質(zhì)量上與競品相比,性能一致。


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成功測試物種 (rRNA Rate < 10%)


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?  MagicPure? mRNA Kit

產(chǎn)品特點   

? 操作簡單。

?提取mRNA得率高,純度高。

?適用于磁棒式高通量核酸提取儀。

文庫產(chǎn)量

分別使用TransGen和Company V產(chǎn)品對人、大鼠、小鼠、煙草、百合、番茄、大豆、擬南芥、小麥和水稻的總RNA進行mRNA捕獲,其中人、大鼠和小鼠投入200 ng總RNA,其他物種投入1000 ng總RNA;使用建庫試劑盒 (TransGen, KP701) 進行RNA文庫構(gòu)建后檢測文庫產(chǎn)量。


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產(chǎn)品信息



產(chǎn)品名稱

目錄號

規(guī)格

TransNGS? RNA-Seq Library Prep Kit for Illumina? 

KP601-01

12 rxns

KP601-02

96 rxns

TransNGS? Fast RNA-Seq Library Prep Kit for Illumina? 

KP701-01

12 rxns

KP701-02

96 rxns

TransNGS? Fast RNA-Seq Library Prep Kit for MGI? 

KP801-01

12 rxns

KP801-02

96 rxns

TransNGS? rRNA Depletion Kit (Human/Mouse/Rat)  

KD101-11

12 rxns

KD101-02

24 rxns

KD101-03

96 rxns

TransNGS? rRNA Depletion Kit (Bacteria)

KD201-11

12 rxns

KD201-02

24 rxns

KD201-03

96 rxns

TransNGS? rRNA Depletion Kit (Animal)

KD301-11

12 rxns

KD301-02

24 rxns

KD301-03

96 rxns

MagicPure? mRNA Kit

EC511-01

24 rxns

EC511-02

96 rxns

TransNGS? Circularization Kit For MGI?

KC101-01

12 rxns

KC101-02

96 rxns

MagicPure? RNA Beads

EC501-01

1 ml

EC501-02

5 ml

EC501-03

60 ml

TransNGS? Library Amplification SuperMix

KA101-01

1 ml

KA101-02

5×1 ml

TransNGS? Library Quantification Kit for Illumina?

KQ101-01

100 rxns

KQ101-02

500 rxns

TransNGS? Library Quantification qPCR SuperMix

KQ201-01

1 ml

KQ201-02

5×1 ml

TransNGS? Library Quantification DNA Standards (S1-S6)

KS101-21

50% , 120 μl each

TransNGS? Library Dilution Buffer

KB101-01

5×1 ml

TransNGS? Single Index Primers Kit for Illumina? (Set 1)

KI201-01

48 rxns

KI201-02

96 rxns

TransNGS? Single Index Primers Kit for Illumina? (Set 2)

KI211-01

48 rxns

KI211-02

96 rxns

TransNGS? Single Index Primers Kit for Illumina? (Set 3)

KI221-01

96 rxns

KI221-02

192 rxns

TransNGS? Dual Index Primers Kit for Illumina? 

KI231-01

48 rxns

KI231-02

96 rxns

TransNGS? Index Primers (384) Kit for Illumina?

KI241-01

96 rxns

KI241-02

384 rxns

TransNGS? UDI Indexed Adapter Kit for Illumina? 

KI341-01

192 rxns

KI341-02

384 rxns

TransNGS? 384 UDI Indexed Adapter Kit for Illumina?

KI351-01

192 rxns

KI351-02

384 rxns

TransNGS? Indexed Adapter Kit for MGI? 

KI401-S1-3-01

10 μl/Index

KI401-S1-3-02

40 μl/Index


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